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流式凋亡檢測(cè)
儀器描述/
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                       實(shí)驗(yàn)原理
    細(xì)胞凋亡(Cell apoptosis)是指為維持內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定,由基因控制的細(xì)胞自主的有序的死亡。細(xì)胞凋亡與細(xì)胞壞死不同,細(xì)胞凋亡不是一件被動(dòng)的過程,而是主動(dòng)過程,它涉及一系列基因的激活、表達(dá)以及調(diào)控等的作用,它并不是病理?xiàng)l件下的損傷,而是為更好地適應(yīng)生存環(huán)境而主動(dòng)爭(zhēng)取的一種死亡過程。
    細(xì)胞凋亡檢測(cè)的方法很多,我們采用的Annexin V/PI雙染法檢測(cè)細(xì)胞凋亡的原理:磷脂酰絲氨酸(Phosphatidyl serine, PS)正常位于細(xì)胞膜的內(nèi)側(cè),但在細(xì)胞凋亡的早期,PS可從細(xì)胞膜的內(nèi)側(cè)翻轉(zhuǎn)到細(xì)胞膜的表面,暴露在細(xì)胞外環(huán)境中。Annexin-V是一種分子量為35~36KD的Ca2+依賴性磷脂結(jié)合蛋白,能與PS高親和力特異性結(jié)合。將Annexin-V進(jìn)行EGFP融合、熒光素(FITC、PE)或biotin標(biāo)記,以標(biāo)記了的Annexin-V作為熒光探針。
實(shí)驗(yàn)流程
    細(xì)胞培養(yǎng)到一定密度后,加藥處理。收集細(xì)胞,孵育抗體,準(zhǔn)備上機(jī)樣本;上機(jī)檢測(cè);結(jié)果分析;
結(jié)果提供
     結(jié)果分析和實(shí)驗(yàn)報(bào)告,原始數(shù)據(jù)。


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流式凋亡檢測(cè),流式凋亡檢測(cè)

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