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CRISPRi 質(zhì)粒(1靶點(diǎn)/基因+測序報告)
催化失活的Cas9(dCas9)連上轉(zhuǎn)錄抑制子,可以有效抑制基因組特定位點(diǎn)的轉(zhuǎn)錄,這一工具被稱為CRISPRi。CRISPRi特別適合分析非編碼RNA的具體功能。
pLVU9i-Puro第三代慢病毒載體,能夠表達(dá)sgRNA和dCas9-KRAB,具有Puro抗性基因。KRAB是強(qiáng)轉(zhuǎn)錄抑制域。
pLVU9i-GFP是第三代慢病毒載體,能夠表達(dá)sgRNA和dCas9-KRAB,具有EGFP熒光標(biāo)記基因。KRAB是強(qiáng)轉(zhuǎn)錄抑制域。
CRISPRi 質(zhì)粒構(gòu)建流程
CRISPRi 質(zhì)粒構(gòu)建服務(wù)說明
1、客戶提供基因名稱和基因編號。
2、HYY提供:
(1)20μg CRISPRi質(zhì)粒,濃度500ng/μL以上,超螺旋率95%以上;
(2)CRISPRi質(zhì)粒的菌液500μL;
(3)CRISPRi質(zhì)粒的測序峰圖、酶切鑒定結(jié)果和序列;
(4)CRISPRi質(zhì)粒的構(gòu)建報告。
3、實(shí)驗周期2~3周。
CRISPRi 質(zhì)粒(1靶點(diǎn)/基因+測序報告),CRISPRi 質(zhì)粒(1靶點(diǎn)/基因+測序報告)
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