我公司總經(jīng)理謝士勇畢業(yè)于華中農(nóng)業(yè)大學生化與分子生物學專業(yè)，博士期間長期從事酵母單/雙雜交文庫構建及篩選的工作，在校期間為實驗室構建了3個高效的水稻酵母雙雜交文庫（組織分別為水稻葉片，幼穗，種子），具有豐富的實踐經(jīng)驗。
    公司在RNA抽提，mRNA純化，酵母轉化等步驟中對于試劑選擇有著獨到的見解，用性價比最高的試劑為客戶節(jié)約成本。同時公司對于反轉錄，酵母轉化，酵母菌落PCR等步驟進行優(yōu)化，使得初始基因豐度更高，最大程度保證互作基因/蛋白不致遺漏；轉化效率更高，提高弱互作因子篩到的可能性；均一化更高，降低重復篩到概率；空載體更少，高效并且節(jié)約成本。詳情請關注公司官網(wǎng)www.xianchunfeng.com

本公司酵母單/雙雜交文庫構建核心優(yōu)勢：

降低客戶成本：酵母單/雙雜交文庫構建實驗步驟多，難度較大，客戶自己購買試劑經(jīng)濟和時間成本較高。

文庫質(zhì)量高：優(yōu)質(zhì)的文庫是篩庫得到陽性克隆的關鍵，本公司承諾次級文庫庫容大于107，重組率大于90%，平均插入片段大于1kb。

Invitrogen核/膜系統(tǒng)（送三框和均一化處理）

實驗原理：

酵母雙雜交
酵母雙雜交系統(tǒng)是在酵母體內(nèi)通過重建有活性轉錄因子的結構來鑒定蛋白質(zhì)之間的相互作用。轉錄因子可以和DNA上特異的序列結合而啟動相應基因的轉錄。這種DNA結合與轉錄激活的功能是由轉錄因子上兩個相互獨立的結構域即DNA結合結構域(Binding Domain, BD)和轉錄激活結構域(Activation Domain, AD)分別來完成的，并且這兩個結構域?qū)τ诨虻霓D錄激活都是必須的。在GAL4系統(tǒng)中利用轉錄因子GAL4的DNA結合結構域GAL4-BD與激活結構域GAL4-AD的特異載體，分別與基因的ORFs融合，轉化酵母細胞。在酵母內(nèi)表達的蛋白若發(fā)生相互作用時，就會將GAL4-BD和GAL4-AD結合在一起，從而與上游激活序列(upstream activating sequence, UAS)結合，激活相應報告基因的表達，在相應的營養(yǎng)缺陷型培養(yǎng)基上篩選陽性。酵母雙雜交文庫的構建是篩庫的前提，可用于目的蛋白的互作蛋白大規(guī)模篩選分析蛋白質(zhì)間的相互作用，是現(xiàn)在分子生物學與生物化學常用的手段。

二、實驗步驟：
1.1   RNA提取

1.2   mRNA分離

1.3   cDNA初級文庫的構建
1.3.1 cDNA第一鏈的合成
1.3.2 cDNA第二鏈的合成
1.3.3 cDNA adapter的制備
1.3.4 cDNA與attB1重組接頭連接(三份接頭各連一份)
1.3.5 cDNA分級分離
1.3.6 BP重組
1.3.7 電轉化大腸桿菌DH10B
1.3.8 文庫克隆檢測
1.3.9 文庫庫容量、重組率、插入片段長度鑒定

1.4   cDNA次級文庫的構建
1.4.1 初級文庫的質(zhì)粒抽提
1.4.2 LR重組
1.4.3 電轉化大腸桿菌DH10B
1.4.4 文庫克隆檢測
1.4.5 文庫庫容量、重組率、插入片段長度鑒定

三、交付結果：
1. 文庫構建報告（電子版），
2. 文庫構建圖片（電子版），
3. 大腸桿菌甘油菌文庫2支，質(zhì)粒文庫1支。

四、服務周期：
30個工作日

五、材料條件：
客戶提供組織或細胞

六、客戶案例
目前我們已經(jīng)成功為陜西師范大學，西北大學，西北農(nóng)林科技大學，唐都醫(yī)院，西京醫(yī)院，第四軍醫(yī)大學，貴州師范大學，華中農(nóng)業(yè)大學等多家單位完成酵母單/雙雜交文庫構建服務，專業(yè)的服務和嚴謹?shù)膽B(tài)度贏得了客戶的一直好評。

七、部分結果圖片

酵母雙雜交文庫構建,酵母雙雜交文庫構建

酵母雙雜交文庫構建信息由西安淳風生物科技有限公司為您提供，如您想了解更多關于酵母雙雜交文庫構建報價、型號、參數(shù)等信息，歡迎來電或留言咨詢。

注：該產(chǎn)品未在中華人民共和國食品藥品監(jiān)督管理部門申請醫(yī)療器械注冊和備案，不可用于臨床診斷或治療等相關用途