024025 甲苯胺藍(lán)-DNA瓊脂

　　(Toluidine Blue-DNA Agar)

　　用 途：

　　甲苯胺藍(lán)-DNA瓊脂用于金黃色葡萄球菌的耐熱核酸酶的試驗(yàn)。 (SN 0172-92)。

　　原 理：

　　具有脫氧核糖核酸酶的細(xì)菌分解培養(yǎng)基中的脫氧核糖核酸(DNA)，使DNA長鏈水解成數(shù)個(gè)單核苷酸的寡核苷酸短鏈，使指示劑甲苯胺藍(lán)作用變成粉紅色;氯化鈣提供陽離子作為激活劑;氯化鈉維持均衡的滲透壓;三羥甲基氨基甲烷為緩沖劑;瓊脂為培養(yǎng)基的凝固劑。

　　培養(yǎng)基配方(每升)：

　　脫氧核糖核酸(DNA) 0.3g

　　氯化鈣 0.0011g

　　氯化鈉 10g

　　甲苯胺藍(lán) 0.083g

　　三羥甲基氨基甲烷 6.1g

　　瓊脂 10g

　　最終pH 9.0±0.2

　　使用方法：

　　1. 稱取甲苯胺藍(lán)-DNA瓊脂26.5g，加入蒸餾水或去離子水1 L，攪拌加熱煮沸至完全溶解，分裝三角瓶，115℃高壓滅菌15min(即用可不需滅菌)，備用。

　　2. 載玻片的制備：取3mL甲苯胺藍(lán)-DNA瓊脂平鋪于在載波片上制成標(biāo)本，待瓊脂凝固后，在瓊脂上打成直徑2mm的小洞(每個(gè)載玻片10-12個(gè))，抽出小洞中的瓊脂塊。

　　3. 從Baird-parker平板挑一個(gè)可疑單菌落接種普通肉湯培養(yǎng)基中，36±1℃培養(yǎng)20h～24h后，經(jīng)過100℃沸水煮15min,取0.01mL接種所制備的載玻片上小洞，于35℃培養(yǎng)4h后，觀察結(jié)果。

　　質(zhì)量控制：

　　質(zhì)控菌株接種后，于35℃培養(yǎng)4h結(jié)果如下：

　　貯 存：2～8℃避光貯存

　　貯 存 期：三年

　　規(guī) 格：100g

　　參考文獻(xiàn):

　　1.SN0172-92 中華人民共和國進(jìn)出口商品檢驗(yàn)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn) 出口食品中金黃色葡萄球菌檢驗(yàn)方法