western blot 是半定量研究蛋白質(zhì)表達(dá)的基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)，常應(yīng)用于對(duì)生物體內(nèi)信號(hào)通路、代謝途徑的研究，對(duì)其中起到關(guān)鍵作用的蛋白進(jìn)行研究，用于蛋白的定性和定量研究。
 

WB的實(shí)驗(yàn)流程

1、提取樣品中的蛋白質(zhì)。

2、測(cè)定蛋白質(zhì)的濃度。

3、SDS-PAGE電泳。

4、轉(zhuǎn)膜。

5、封閉。

6、孵育一抗。

7、洗滌。

8、孵育二抗。

9、洗滌。

10、顯影。

11、灰度分析。
 

Western blot實(shí)驗(yàn)樣品要求：

新鮮或正確保存的組織、細(xì)胞或蛋白樣品。

組織樣品：每份樣品約250~500mg;

細(xì)胞樣品：每份樣品約1×106~1×107 細(xì)胞數(shù);

蛋白樣品：裂解樣品總蛋白量>500μg/樣品，濃度≥2μg/μl。

冷凍樣品應(yīng)保存于-80℃，最好使用干冰運(yùn)輸?shù)竭_(dá)實(shí)驗(yàn)室。
 

Western blot實(shí)驗(yàn)報(bào)告呈現(xiàn)：

樣品處理流程

實(shí)驗(yàn)操作步驟

原始WB圖片

軟件Image J初步分析灰度值表

如有需要提供柱狀圖

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注：該產(chǎn)品未在中華人民共和國(guó)食品藥品監(jiān)督管理部門申請(qǐng)醫(yī)療器械注冊(cè)和備案，不可用于臨床診斷或治療等相關(guān)用途