免疫共沉淀(coimmunoprecipitation)是一種在體外探測兩個(gè)蛋白分子間是否存在特異性相互作用的一種方法。其原理是如果兩個(gè)蛋白在體外體系能夠發(fā)生特異性相互作用的話，那么當(dāng)用一種蛋白的抗體進(jìn)行免疫沉淀時(shí)，另一個(gè)蛋白也會(huì)被同時(shí)沉淀下來。與酵母雙雜交技術(shù)不同，免疫共沉淀技術(shù)所利用的是抗原和抗體間的免疫反應(yīng)，是一種基于體外非細(xì)胞的環(huán)境中研究蛋白質(zhì)與蛋白質(zhì)的相互作用的方法。 相互作用的蛋白質(zhì)都是經(jīng)翻譯后修飾的，處于天然狀態(tài);蛋白的相互作用是在自然狀態(tài)下進(jìn)行的，可以避免人為的影響;可以分離得到天然狀態(tài)的相互作用蛋白復(fù)合物。
 

免疫共沉淀(Co-IP)應(yīng)用范圍

1. 測定兩種目標(biāo)蛋白質(zhì)是否在體內(nèi)結(jié)合;

2. 確定一種特定蛋白質(zhì)的新的作用搭檔;

3. 分離得到天然狀態(tài)的相互作用蛋白復(fù)合物。
 

實(shí)驗(yàn)步驟

1. 在細(xì)胞裂解液中孵育抗體

2. 將樣品加入蛋白A/G瓊脂糖樹脂

3. 通過離心去除未結(jié)合蛋白

4. 洗脫結(jié)合蛋
 

免疫共沉淀(Co-IP)服務(wù)內(nèi)容

1. 樣本總蛋白提取及與特定抗體反應(yīng);

2. 用Protein A/G捕獲特定的抗體—蛋白復(fù)合物;

3. 洗滌去掉未被捕獲的蛋白，得到純蛋白抗體符合物;

4. 通過SDS-PAGE或Western Blot檢測IP結(jié)果;

5. 向客戶提交實(shí)驗(yàn)結(jié)果圖、分析結(jié)果及實(shí)驗(yàn)報(bào)告。
 

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