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ELISA檢測
儀器描述

 

  酶聯(lián)免疫吸附測定法
  1971年瑞典學(xué)者Engvail和Perlmann,荷蘭學(xué)者Van Weerman和Schuurs分別報道將免疫技術(shù)發(fā)展為檢測體液中微量物質(zhì)的固相免疫測定方法,即酶聯(lián)免疫吸附測定法 (enzyme-linked immunosorbent assay , ELISA) 。ELISA已成為分析化學(xué)領(lǐng)域中的前沿課題 ,它是一種特殊的試劑分析方法,是在免疫酶技術(shù)( immunoenzymatic techniques ) 的基礎(chǔ)上發(fā)展起來的一種新型的免疫測定技術(shù) 。

2、基本原理
  它采用抗原與抗體的特異反應(yīng)將待測物與酶連接,然后通過酶與底物產(chǎn)生顏色反應(yīng),用于定量測定。測定的對象可以是抗體也可以是抗原。
  在這種測定方法中有3種必要的試劑:①固相的抗原或抗體(免疫吸附劑) ②酶標(biāo)記的抗原或抗體(標(biāo)記物)③酶作用的底物(顯色劑)
  測量時,抗原(抗體)先結(jié)合在固相載體上,但仍保留其免疫活性,然后加一種抗體(抗原)與酶結(jié)合成的偶聯(lián)物(標(biāo)記物),此偶聯(lián)物仍保留其原免疫活性與酶活性,當(dāng)偶聯(lián)物與固相載體上的抗原(抗體)反應(yīng)結(jié)合后,再加上酶的相應(yīng)底物,即起催化水解或氧化還原反應(yīng)而呈顏色。
  其所生成的顏色深淺與欲測的抗原(抗體)含量成正比。 這種有色產(chǎn)物可用肉眼、光學(xué)顯微鏡、電子顯微鏡觀察,也可以用分光光度計(酶標(biāo)儀)加以測定。其方法簡單,方便訊速,特異性強。

3、分類
  該法由種類和變化可分為以下幾種:
 ?。ㄒ唬╇p抗體夾心法
  (二)間接法
 ?。ㄈ└偁幏?br style="" class=""> ?。ㄋ模╇p位點一步法
 ?。ㄎ澹┎东@法測IgM抗體
 ?。?yīng)用親和素和生物素的ELISA

4、特點
該法相較其他方法而言,有幾大特點
  靈敏性高
  該測定法的靈敏度來自作為報告集團(tuán)的酶。眾所周知, 酶是一種有機催化劑,很少量的酶即可誘導(dǎo)大量的催化反應(yīng) ,產(chǎn)生可供觀察的顯色反應(yīng)現(xiàn)象。因此該體系常被稱為酶放大體系。ELISA實現(xiàn)了在細(xì)胞或亞細(xì)胞水平上示蹤抗原或抗體的所在部位,或在微克、甚至納克水平上對其進(jìn)行定量。
  

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