酵母雙雜交
原理：
酵母雙雜交系統(tǒng)的建立基于對(duì)真核生物調(diào)控轉(zhuǎn)錄起始過(guò)程的認(rèn)識(shí)。酵母轉(zhuǎn)錄因子GAL4含兩個(gè)結(jié)構(gòu)域：DNA結(jié)合功能域和轉(zhuǎn)錄激活結(jié)構(gòu)域，前者可識(shí)別DNA上的特異序列，并使轉(zhuǎn)錄激活結(jié)構(gòu)域定位于所調(diào)節(jié)基因的上游，后者同轉(zhuǎn)錄復(fù)合體的其他成分作用，啟動(dòng)相應(yīng)基因的轉(zhuǎn)錄。將編碼DNA結(jié)合功能域的基因與已知誘餌蛋白質(zhì)基因構(gòu)建在同一個(gè)表達(dá)載體上，在酵母中表達(dá)兩者的融合蛋白，將編碼DNA轉(zhuǎn)錄激活域的基因和cDNA文庫(kù)的基因構(gòu)建在AD—LIBRARY表達(dá)載體上，同時(shí)將上述兩種載體轉(zhuǎn)化改造后的酵母。當(dāng)兩種載體所表達(dá)的融合蛋白能夠相互作用時(shí)，功能重建的反式作用因子能夠激活酵母基因組中的報(bào)告基因，從而通過(guò)功能互補(bǔ)和顯色反應(yīng)篩選到陽(yáng)性菌落。將陽(yáng)性反應(yīng)的酵母菌株中的AD—LIBRARY載體提取分離出來(lái)，從而對(duì)載體中插入的文庫(kù)基因進(jìn)行測(cè)序和分析工作。 在以上傳統(tǒng)的酵母雙雜交系統(tǒng)中，蛋白之間的相互作用是在細(xì)胞核內(nèi)發(fā)生的。 然而許多待研究的蛋白質(zhì)是膜蛋白, 它們需定位到膜上之后才能表現(xiàn)正常的生物功能，因此根據(jù)需要又發(fā)展了新的雙雜交系統(tǒng)，例如Sos蛋白介導(dǎo)的雙雜交系統(tǒng), 也被稱為Sos救活系統(tǒng)(Sos recruitment system)，來(lái)彌補(bǔ)傳統(tǒng)系統(tǒng)的缺陷。
 
實(shí)驗(yàn)流程：
目前我們可提供適用于漿蛋白、核蛋白及膜蛋白酵母雙雜交實(shí)驗(yàn)服務(wù)的兩套系統(tǒng)，包括：Clontech GAL4-based two-hybrid system 適用于誘餌蛋白為漿蛋白、核蛋白 ;Stratagene Cytotrap Psos system 適用于誘餌蛋白為膜蛋白。
具體服務(wù)內(nèi)容包括：
1. 蛋白質(zhì)兩兩之間相互作用的實(shí)驗(yàn)
內(nèi)容包括：
1). 基因克隆的獲得及DNA測(cè)序檢驗(yàn)；
2). 基因的酵母雙雜交載體構(gòu)建及其DNA測(cè)序檢驗(yàn)；；
3). 每個(gè)基因克隆的酵母雙雜交自激活檢驗(yàn)；
4). 酵母細(xì)胞內(nèi)的相互作用驗(yàn)證
2. 蛋白質(zhì)與文庫(kù)相互作用的實(shí)驗(yàn)
內(nèi)容包括：
1). 誘餌基因克隆的獲得及DNA測(cè)序檢驗(yàn)；
2). 誘餌基因的酵母雙雜交載體構(gòu)建及其DNA測(cè)序檢驗(yàn)；
3). 誘餌基因的酵母雙雜交自激活檢驗(yàn)；
4). 酵母雙雜交文庫(kù)篩選；
5). 酵母細(xì)胞內(nèi)的相互作用驗(yàn)證（酵母回轉(zhuǎn)驗(yàn)證）；
6). 陽(yáng)性克隆DNA序列測(cè)定；
 
 
相關(guān)要求(客戶提供)：
1. 含有誘餌基因片段的質(zhì)?；蚓?；
2. 用于篩選的文庫(kù)質(zhì)?；蚓辍?br style="" class=""> 
最終結(jié)果：
1. 構(gòu)建得到的誘餌質(zhì)粒；
2. 自激活及WB檢測(cè)誘餌基因表達(dá)結(jié)果；
3. 篩到的相互作用陽(yáng)性克隆DNA和菌株實(shí)物；
4. 具體試驗(yàn)流程(包括：實(shí)驗(yàn)步驟；主要儀器及試劑說(shuō)明(含儀器廠家、型號(hào)；試劑廠家、批號(hào)))；
5. 原始實(shí)驗(yàn)圖片及數(shù)據(jù)。
 

天津科斯莫生物科技有限公司：
       為各位新老客戶提供高質(zhì)，高效的技術(shù)服務(wù)！

科斯莫生物相關(guān)服務(wù)：
       MicroRNA相關(guān)服務(wù)、siRNA干擾、課題整體外包服務(wù)、基因克隆服務(wù)、慢病毒包裝服務(wù)、腺病毒服務(wù)、穩(wěn)定細(xì)胞株篩選服務(wù)、蛋白表達(dá)服務(wù)、抗體制備服務(wù)、DNA與蛋白相互作用研究、噬菌體展示技術(shù)服務(wù)、cDNA文庫(kù)構(gòu)建、干細(xì)胞研究、基金申請(qǐng)、標(biāo)書撰寫、專利申請(qǐng)、課題設(shè)計(jì)等

詳情請(qǐng)聯(lián)系我們：
電話******br>郵箱：zxm@cosmobiolab.com  
科斯莫生物主頁(yè)：www.cosmobiolab.com
地址：天津市濱海新區(qū)天津國(guó)際生物醫(yī)藥聯(lián)合研究院

酵母雙雜交服務(wù) ,酵母雙雜交

酵母雙雜交服務(wù) 信息由天津科斯莫生物技術(shù)有限公司為您提供，如您想了解更多關(guān)于酵母雙雜交服務(wù) 報(bào)價(jià)、型號(hào)、參數(shù)等信息，歡迎來(lái)電或留言咨詢。

注：該產(chǎn)品未在中華人民共和國(guó)食品藥品監(jiān)督管理部門申請(qǐng)醫(yī)療器械注冊(cè)和備案，不可用于臨床診斷或治療等相關(guān)用途