詳細說明
產品簡介:
碧云天生產的細胞凋亡與壞死檢測試劑盒(Apoptosis and Necrosis Assay Kit)為您提供了一種經典而又快速簡便的細胞凋亡與細胞壞死檢測方法。
本試劑盒采用Hoechst 33342和碘化丙啶(Propidium Iodide,PI)雙染的方法。細胞發(fā)生凋亡時,染色質會固縮。Hoechst 33342可以穿透細胞膜,染色后凋亡細胞熒光會比正常細胞明顯增強。碘化丙啶(PI)不能穿透細胞膜,對于具有完整細胞膜的正常細胞或凋亡細胞不能染色。而對于壞死細胞,其細胞膜的完整性喪失,碘化丙啶(PI)可以染色壞死細胞。上述兩種染料雙染后,使用流式細胞儀或熒光顯微鏡檢測時,正常細胞為弱紅色熒光+弱藍色熒光,凋亡細胞為弱紅色熒光+強藍色熒光,壞死細胞為強紅色熒光+強藍色熒光。參考下圖,左圖為誘導凋亡前的正常細胞,右圖為誘導凋亡后的細胞。
染色快速方便,兩種染料的染色僅需20-30分鐘,一步染色即可完成。
使用方便,使用流式細胞儀檢測時,無需稀釋等配制過程,也無需再準備其它任何溶液。
本試劑盒足夠檢測100個樣品,每個樣品的細胞數量可以為10-100萬。
包裝清單:
產品編號 | 產品名稱 | 包裝 |
C1056-1 | 細胞染色緩沖液 | 100ml |
C1056-2 | Hoechst染色液 | 0.5ml |
C1056-3 | PI染色液 | 0.5ml |
— | 說明書 | 1份 |
保存條件:
4℃保存六個月有效,-20℃保存一年有效。Hoechst染色液和PI染色液需避光保存。
注意事項:
需使用流式細胞儀進行紅色和藍色雙熒光檢測。也可使用熒光顯微鏡檢測。
染色后宜盡快檢測。
Hoechst 33342對人體有害,碘化丙啶(PI)對人體有刺激性,請注意適當防護。
為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
使用說明:
1. 每個樣品收集約10-100萬細胞于1.5ml離心管內,離心棄上清。細胞沉淀用0.8-1毫升細胞染色緩沖液重
懸。
2. 加入5微升Hoechst染色液。
3. 加入5微升PI染色液。
4. 混勻,冰浴或4℃孵育20-30分鐘。
5. 用流式細胞儀檢測紅色熒光和藍色熒光。
6. 如果使用熒光顯微鏡檢測,檢測前離心沉淀細胞,用PBS洗滌一次,再涂片觀察紅色熒光和藍色熒光。對
于貼壁細胞使用熒光顯微鏡檢測,可以不收集細胞,直接依次按照上述比例加入細胞染色緩沖液、
Hoechst染色液和PI染色液冰浴或4℃染色20-30分鐘。染色后PBS洗滌一次,再在熒光顯微鏡下觀察。