中文名:瓊脂糖凝膠4B

英文名:Sepharose 4B

CAS:N/A

級別:試劑級

分子量:N/A

分子式:N/A

純度:N/A

儲存條件:RT

產(chǎn)品簡介

 瓊脂糖凝膠4B是用4%濃度瓊脂糖制備成的球型顆粒，作為凝膠層析介質(zhì)使用。

1. 外觀

 本品為乳白色球狀凝膠，無嗅、無味、無肉眼可見雜質(zhì)。

2. 理化指標(biāo)

*檢測條件： 層析柱10mm×300mm  *柱床高15cm，25℃，流動相為0.1mol/LNaCl。

3 包裝

產(chǎn)品以聚胺酯瓶密封包裝，外貼標(biāo)簽，注明“品名、體積、顆粒大小”等內(nèi)容。

4 貯存

產(chǎn)品應(yīng)密封貯存在4℃~25℃（保存溶液為20%乙醇），通風(fēng)、干燥、清潔的地方。不能冷凍。

用過的柱子貯存在4℃（20%乙醇）。

5 注意事項

本品應(yīng)避免與氧化劑接觸，避免長時間暴露在空氣中

6 運輸

運輸中應(yīng)避免日曬、雨淋、重壓，嚴(yán)禁與有毒、有害物品混運。

7 保質(zhì)期

5年。

8 應(yīng)用

本產(chǎn)品為傳統(tǒng)的瓊脂糖介質(zhì)，非特異性吸附低，回收率高，可多次重復(fù)使用等特點，用于分子量差異大、對分辨率要求不高的樣品的凝膠層析純化。下面簡要介紹介質(zhì)的使用過程。

8.1 裝柱

凝膠過濾介質(zhì)的使用對裝柱的要求較高，為了保證分離效果，一般通過柱子上加一個裝柱器來使分離柱裝滿凝膠，或采用帶有軸向加壓裝置的柱子。凝膠柱床一般高于60cm。裝柱效果可用染料或丙酮-水溶液進行檢驗。

以下過程為通用介質(zhì)裝填過程。若為帶有軸向加壓裝置的柱子，可在柱床穩(wěn)定后將柱床壓緊，接好管路。

（1）讓所有的材料和試劑達到室溫。配制緩沖液。凝膠層析上樣、平衡和洗脫只用一種低鹽濃度的緩沖液。

（2）選擇一根一定直徑的柱子，長約30~60cm,根據(jù)柱子大小取所需量的凝膠（約為柱床體積的1.15倍），清洗掉20%乙醇，抽干，用緩沖液（按凝膠：緩沖液=3：1的比例）配成勻漿。不要劇烈攪動，以免攪壞微球。

（3）將柱內(nèi)及柱子底端用水或緩沖液潤濕并保持一小段液位（液面略高于濾膜），務(wù)必使底端無氣泡。

（4）用玻璃棒引導(dǎo)勻漿沿著柱內(nèi)壁一次性倒入柱內(nèi)，注意勿使產(chǎn)生氣泡。打開柱子出液口，使凝膠在柱內(nèi)自由沉降，連結(jié)好柱子頂端柱頭。

（5）打開蠕動泵，讓緩沖液緩慢流過，使柱床穩(wěn)定。

（6）最好用一個裝柱器輔助裝柱。裝完后柱床上端輕輕刮平，上好柱頭。

8.2平衡

讓緩沖液以一定流速流過柱子，到流出液電導(dǎo)和pH不變。

8.3上樣

（1）樣品用緩沖液配制，渾濁的樣品要離心和過濾后上樣。含鹽量過大、濃度過小的樣品要先做處理，再上樣。

（2）介質(zhì)對樣品組分的分離是按組分分子量大小進行的，分子量大的先流出來。

（3）上樣體積約為柱體積的1~2%，越小分離越好。