? 服務(wù)介紹

       酶聯(lián)免疫(ELISA)，利用抗原與抗體的特異性反應(yīng)將待測物與酶連接，然后TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。根據(jù)顏色反應(yīng)定量目標(biāo)抗原或抗體含量。該技術(shù)可用于檢測大分子抗原和特異性抗體等，具有快速、靈敏、簡便、載體易于標(biāo)準(zhǔn)化等優(yōu)點。

? 實驗流程

       試劑盒：以實際試劑盒品牌為準(zhǔn)

　　實驗流程(具體步驟以說明書為準(zhǔn)):

　　1.樣本準(zhǔn)備：血清、血漿、組織勻漿、細(xì)胞上清;

　　2.操作步驟：處理樣本配制標(biāo)準(zhǔn)品—加樣(標(biāo)準(zhǔn)品及樣本)—洗板，加檢測抗體溶液，孵育—洗板，加酶溶液，孵育— 洗板，加TMB底物— 加終止液50ul，立即450nm讀數(shù)(雙抗夾心法)

　　處理樣本配制標(biāo)準(zhǔn)品—加樣(標(biāo)準(zhǔn)品及樣本)—加酶溶液—加檢測抗體— 混勻孵育— 洗板，加TMB顯色— 加終止液50ul，立即450nm讀數(shù)(競爭法)

　　3.實驗結(jié)果：有樣本OD值代入標(biāo)曲中計算出濃度，結(jié)果以EXCEL形式發(fā)出。

? 送樣運輸要求

      1、動植物組織樣本(干冰運輸)

　　準(zhǔn)確稱取動物組織重量按重量(mg)：體積(ul)=1:9的比例加入9倍體積的勻漿介質(zhì)(推薦0.86%或0.9%的生理鹽水)，冰水浴條件下，機械勻漿，制備成10%的勻漿液，2500~3000轉(zhuǎn)/分鐘，離心10分鐘，取上清液進行測定。

　　2、血清樣本(干冰運輸)

　　全血標(biāo)本請于室溫放置2小時或4℃過夜后于2-8℃ 3000轉(zhuǎn)/分離心15min，取上清即可立即檢測;或進行分裝，并將標(biāo)本放于-20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。解凍后的樣本應(yīng)再次離心，然后檢測。

　　3、血漿樣本(干冰運輸)

　　可用EDTA或肝素作為抗凝劑，標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)于2-8℃3000轉(zhuǎn)/分離心15min，取上清即可立即檢測;或進行分裝，并將標(biāo)本放于-20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。解凍后的樣本應(yīng)再次離心，然后檢測。

　　4、細(xì)胞樣本

　　貼壁細(xì)胞：將細(xì)胞用PBS沖洗2次后，用細(xì)胞刮將細(xì)胞小心刮下來，將培養(yǎng)液3000轉(zhuǎn)/分，離心10min。棄上清留細(xì)胞沉淀，干冰運輸。

　　懸浮細(xì)胞：將培養(yǎng)液3000轉(zhuǎn)/分，離心10min。棄上清留細(xì)胞沉淀，干冰運輸。

　　細(xì)胞上清：標(biāo)本于2-8℃，3000轉(zhuǎn)/分離心15min取上清，上清立即用于實驗，或分裝后于-20℃或-80℃保存。避免反復(fù)凍融。