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應(yīng)用實(shí)驗(yàn)原理操作步驟 專題
中文名稱 | 豬超氧化物歧化酶(SOD)ELISA試劑盒 |
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中文同義詞 | 豬超氧化物歧化酶(SOD)ELISA試劑盒 |
英文名稱 | PoFAine Super Oxidase Dimutase,SOD ELISA Kit |
英文同義詞 | PoFAine Super Oxidase Dimutase,SOD ELISA Kit |
CAS號 | |
分子式 | |
分子量 | 0 |
EINECS號 | |
相關(guān)類別 | |
Mol文件 | Mol File |
結(jié)構(gòu)式 |
應(yīng)用
豬超氧化物歧化酶(SOD)ELISA試劑盒用于檢測血清等樣本中超氧化物歧化酶(SOD)的含量。
實(shí)驗(yàn)原理
試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。往預(yù)先包被目標(biāo)物抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的目標(biāo)物呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計(jì)算樣品濃度。
操作步驟
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;
3.樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。
4.除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板4-5次(也可用洗板機(jī)洗板)。
6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。
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