酵母基因組DNA提取試劑盒

背景原理操作方法保存條件純度檢測(cè) 專(zhuān)題

中文名稱(chēng)	酵母基因組DNA提取試劑盒
中文同義詞	酵母基因組DNA提取試劑盒
英文名稱(chēng)	Yeast Genomic DNA Extraction Kit
英文同義詞	Yeast Genomic DNA Extraction Kit
CAS號(hào)
分子式
分子量	0
EINECS號(hào)
相關(guān)類(lèi)別	DNA提取與純化;基因;基因組提取
Mol文件	Mol File
結(jié)構(gòu)式

酵母基因組DNA提取試劑盒 性質(zhì)

酵母基因組DNA提取試劑盒 用途與合成方法

背景

酵母DNA提取試劑盒(Yeast DNA Kit)采用了一種新型的硅膠柱。在特定條件下，使DNA能在離心過(guò)柱的瞬間，結(jié)合到純化柱上，在一定條件下又能將DNA充分洗脫，從而實(shí)現(xiàn)DNA的快速純化。無(wú)需酚氯仿抽提，無(wú)需酒精沉淀。純化的DNA可直接用于PCR、Southern雜交和酶切等。

原理

采用改進(jìn)SDS-堿裂解法裂解細(xì)胞并結(jié)合破壁酶特異消化酵母細(xì)胞壁，能在1小時(shí)內(nèi)從酵母培養(yǎng)液中分離出高純度質(zhì)粒DNA。酵母收集后,加入破壁酶去除細(xì)胞壁后,然后堿裂法裂解細(xì)胞，離心吸附柱內(nèi)的硅基質(zhì)膜在高鹽、低PH值狀態(tài)下選擇性地結(jié)合溶液中的質(zhì)粒DNA，再通過(guò)去蛋白液和漂洗液將雜質(zhì)和其它細(xì)菌成分去除，最后低鹽、高PH值的洗脫緩沖液將純凈質(zhì)粒DNA從硅基質(zhì)膜上洗脫。

操作方法

酵母細(xì)胞經(jīng)lyticase處理去除細(xì)胞壁后，獨(dú)特的結(jié)合液/蛋白酶K迅速裂解細(xì)胞和滅活細(xì)胞內(nèi)核酸酶，然后基因組DNA在高離序鹽狀態(tài)下選擇性吸附于離心柱內(nèi)硅基質(zhì)膜，再通過(guò)一系列快速的漂洗－離心的步驟，抑制物去除液和漂洗液將細(xì)胞代謝物，蛋白等雜質(zhì)去除，最后低鹽的洗脫緩沖液將純凈基因組DNA從硅基質(zhì)膜上洗脫。

保存條件

室溫保存，12個(gè)月內(nèi)有效。Proteinase K與Lyticase-20℃保存。

純度檢測(cè)

基因組DNA片段的大小與樣品保存時(shí)間、操作過(guò)程中的剪切力等因素有關(guān)。提取的DNA片段可用瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計(jì)檢測(cè)濃度與純度。可配制0.8-1.0％瓊脂糖凝膠，使用λ/HindIII判斷基因組的大小，完整的基因組大小應(yīng)在23kb以上。使用分光光度計(jì)檢測(cè)時(shí)， OD260/OD280比值應(yīng)為1.7–1.9之間，如果洗脫時(shí)不使用洗脫緩沖液，而使用去離子水洗脫，比值可能偏低，但并不表明DNA純度不高。

安全信息

MSDS信息

酵母基因組DNA提取試劑盒 上下游產(chǎn)品信息