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概述應(yīng)用推薦使用量及產(chǎn)量注意事項 專題
中文名稱 | 酵母高純質(zhì)粒小量快速提取試劑盒 |
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中文同義詞 | 酵母高純質(zhì)粒小量快速提取試劑盒 |
英文名稱 | NA |
英文同義詞 | |
CAS號 | |
分子式 | |
分子量 | 0 |
EINECS號 | |
相關(guān)類別 | |
Mol文件 | Mol File |
結(jié)構(gòu)式 |
概述
酵母高純質(zhì)粒小量快速提取試劑盒采用改進SDS-堿裂解法裂解細胞,并結(jié)合Lytic Enzyme特異消化酵母細胞壁,能在1 h內(nèi)從酵母培養(yǎng)液中分離出高純度質(zhì)粒DNA。酵母收集后,加入破壁酶去除細胞壁,然后堿裂法裂解細胞,離心吸附柱內(nèi)的硅基質(zhì)膜在高鹽、低PH值狀態(tài)下選擇性地結(jié)合溶液中的質(zhì)粒DNA,再通過去蛋白液和漂洗液將雜質(zhì)和其它細菌成分去除,最后低鹽、高PH值的洗脫緩沖液將純凈質(zhì)粒DNA從硅基質(zhì)膜上洗脫。
應(yīng)用
酵母高純質(zhì)粒小量快速提取試劑盒的應(yīng)用:獲得的質(zhì)粒產(chǎn)量高、純度好,可以直接用于酶切、轉(zhuǎn)化、PCR、體外轉(zhuǎn)錄、測序等各種分子生物學(xué)實驗。
推薦使用量及產(chǎn)量
酵母高純質(zhì)粒小量快速提取試劑盒的推薦使用量及產(chǎn)量:通常酵母質(zhì)??截悢?shù)都很低,一般通過電泳或者分光光度計都很難檢測到。提取的質(zhì)粒如果用于下游試驗時通常建議使用量為:1-5 μL用做PCR模板,5-10 μL用于轉(zhuǎn)化大腸桿菌,選擇商業(yè)化的高效率的感受態(tài)細胞。
注意事項
使用酵母高純質(zhì)粒小量快速提取試劑盒注意事項:
1. 所有離心操作步驟,均在室溫(15-25℃)下進行。
2.環(huán)境溫度低時溶液YP2中SDS可能會析出渾濁或者沉淀,可在37℃水浴加熱幾分鐘,即可恢復(fù)澄清,不要劇烈搖晃,以免形成過量的泡沫。
3.溶液YP3和去蛋白液PE中含有刺激性化合物,操作時要戴乳膠手套,避免沾染皮膚、眼睛和衣服。若沾染皮膚、眼睛時,要用大量清水或者生理鹽水沖洗。
4. Lytic Enzyme為蝸牛酶甘油儲液,因此比較粘稠,請小心取用,-20℃保存。蝸牛酶是從蝸牛的嗦囊和消化道中制備的混合酶,它含有纖維素酶,果膠酶,淀粉酶,蛋白酶等20多種酶。適合破碎溶解各種酵母的細胞壁。
5.避免試劑長時間暴露于空氣中產(chǎn)生揮發(fā)、氧化、pH值變化,各溶液使用后應(yīng)及時蓋緊瓶蓋。
6.首次使用前請先在漂洗液WB瓶中加入指定量無水乙醇,充分混勻,加入后請及時在方框打鉤標(biāo)記已加入乙醇,以免多次加入! ◇ 將溶液YP3放在冰上預(yù)冷。
7.關(guān)于平衡液的使用:取一個新的硅膠膜吸附柱裝在收集管中,吸取100 μL的平衡液至柱中。12,000 rpm離心1 min,倒掉收集管中廢液,將吸附柱重新放回收集管,備用。平衡液在保存過程中可能有沉淀生成,請加熱至37 ℃使沉淀完全消失。
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